Özet:
Bu deney, ticari bir toksin bağlayıcının (Bentomax Plus) aflatoksin B1’in etlik piliçlerin büyümesi ve performansı üzerindeki olumsuz etkilerini azaltmadaki etkisini araştırmak için yürütülmüştür. Bu çalışmada, 5 tedavi, 4 tekrar ve her tekrar için 16 tavuk ile tamamen rastgele bir tasarımda 320 Ross 308 etlik piliç kullanılmıştır. Deneysel tedaviler şunlardı: 1) Negatif kontrol (aflatoksinsiz diyet ve Bentomax Plus) 2) Pozitif kontrol (aflatoksin içeren) 3) Pozitif kontrol + 0,5 kg/ton Bentomax Plus 4) Pozitif kontrol + 1 kg/ton Bentomax Plus 5) Pozitif kontrol + 2 kg/ton Bentomax Plus. Pozitif kontrol grubunda yem tüketimi ve kilo alımı diğer gruplara kıyasla azalmıştır (p<0,05). Negatif kontrol grubunda ve Bentomax Plus içeren gruplarda yem dönüşüm oranı pozitif kontrol grubuna göre önemli ölçüde düşüktü (p<0,05). Pozitif kontrol grubunda karkas verimi diğer gruplara göre önemli ölçüde düşüktü (p<0,05). Pozitif kontrol grubunda göreceli karaciğer ağırlığı diğer gruplara göre arttı (p<0,05), ancak kalp, taşlık, dalak, ön mide ve karın yağının göreceli ağırlığı etkilenmedi (p>0,05). Pozitif kontrol grubunda göreceli Fabricius bursası ağırlığı diğer gruplara göre önemli ölçüde düşüktü (p<0,05). Sonuçlar, çok bileşenli bir toksin bağlayıcının (Bentomax Plus) eklenmesinin aflatoksinin piliçlerin büyümesi ve performansı üzerindeki olumsuz etkilerini azaltabileceğini gösterdi.
Giriş:
Mikotoksinler, hayvan ve insan gıdalarında yaygın olarak bulunan ve dünya çapında hayvancılıkta önemli ekonomik kayıplara neden olan bir grup mantar ikincil metabolitidir (Dresjant ve diğerleri, 2003). Bilinen yüzlerce mikotoksin türü arasında, aflatoksinler, okratoksinler, trikotesenler, zearalenonlar ve sitrininler de dahil olmak üzere birkaçı kümes hayvanı endüstrisinde önemlidir. Aflatoksinler, Aspergillus flavus ve Aspergillus parasiticus mantarları tarafından üretilen gıdalardaki yaygın toksinler grubudur.
Aflatoksinler, B1, B2, G1 ve G2 türlerini içerir ve bunların arasında B1 türü en toksik ve kanserojen olanıdır. Gıdaların aflatoksin kontaminasyonu önemli bir küresel sorundur ve tahminler, dünya tahıl üretiminin en az %25’inin mikotoksinlerle kirlendiğini göstermektedir (Binder ve diğerleri, 2007). Aflatoksinlerin izolasyonu ve tanımlanmasından bu yana, bu bileşikler çeşitli biyolojik etkileri (kanserojenlik, mutajenlik, teratojenlik, hepatotoksisite, nefrotoksisite, deri toksisitesi ve immünosüpresif etkiler dahil) ve biyokimyasal etkileri (karbonhidrat ve lipid metabolizması, protein ve nükleik asit sentezi üzerindeki etkiler dahil) nedeniyle insan ve hayvan sağlığında özel bir yer edinmiştir (Daghir ve ark., 1995).
Aflatoksinlerin neden olduğu hastalığa aflatoksikozis denir. Aflatoksikozis, hem erkek hem de dişi domuzlarda kilo alımı, yem alımı ve yem verimliliği dahil olmak üzere tüm önemli üretim endeksleri üzerinde zararlı etkilere neden olur. Broilerlerde aflatoksikozis esas olarak kronik bir formda ortaya çıkar ve en önemli semptomları arasında büyüme geriliği, vücut ağırlığı ve yem alımı kaybı, azalmış yem verimliliği, soluk renk, felç ve topallık bulunur (Kobena ve ark., 1998). Aflatoksikozun neden olduğu en önemli değişiklikler karkas, karaciğer ve daha sonra böbrekler ve lenf dokularında meydana gelir (Kobena ve ark., 1998). Genel olarak, aflatoksikoz kuşların bazı kan ve serum biyokimyasal endekslerinde değişikliklere neden olur. Kan endekslerinde bildirilen değişiklikler arasında hematokrit, hemoglobin, kırmızı kan hücresi sayısı ve lenfosit yüzdesinde azalma ve toplam beyaz kan hücresi sayısı ve heterofil yüzdesinde artış yer alır (Ogaz ve ark., 2000; Raju ve Devagoda, 2000).
Aflatoksinleri gidermek veya etkisiz hale getirmek için fiziksel, kimyasal ve biyolojik yöntemler de dahil olmak üzere çeşitli beslenme stratejileri önerilmiştir, ancak mikotoksin zehirlenmesini önlemek için en etkili beslenme yöntemi adsorban bileşiklerin kullanılmasıdır (Wang ve ark., 2006). Bu malzemelerin en önemlileri arasında ticari olarak temin edilebilen mayalardan türetilen bentonitler, zeolitler, alüminosilikatlar ve glukomannanlar bulunur (Kisses vd., 1998). Yukarıdaki bileşiklere toksin bağlanma derecesi önemli ölçüde değişir. Kil gibi bu malzemelerden bazıları yalnızca aflatoksinlere bağlanır ve diğer toksinleri sindirim sisteminde değişmeden bırakır, ancak maya hücre duvarları veya esterleştirilmiş glukomannan gibi bu malzemelerden bazıları çok çeşitli mikotoksinlere karşı etkilidir (Aravind vd., 2003).
Bentomax Plus, en iyi alüminyum silikat adsorbanlarını, maya ve bakteri hücre duvarlarını çok büyük adsorpsiyon yüzeyleri ve çok sayıda çeşitli adsorpsiyon alanıyla birleştiren organik-mineral bir kombinasyondur. Glukomannanın yapısında, kapasitesi ve afinitesi artırılacak şekilde değişiklikler yapılmıştır. Maya hücre duvarları üzerinde yapılan araştırmalar, bu organik bileşiklerin piliçlerde aflatoksin, okratoksin A ve T2 toksininin bireysel ve birleşik etkilerini azaltmada etkili olduğunu ve vücut ağırlığını ve serum antikor titresini önemli ölçüde artırdığını kanıtlamıştır (Raju ve Devagoda, 2000). Bu nedenle, bu çalışma Bentomax Plus’ın Ross suşu piliçlerinin performansı üzerindeki aflatoksinlerin olumsuz etkilerini azaltmadaki etkilerini araştırmak için yürütülmüştür.
Malzemeler ve Yöntemler:
Deneysel Diyetlerin Hazırlanması
Başlangıç (0-21) ve büyütme (22-42) dönemleri için kontrol diyetleri hazırlandı ve NRC (1995) broiler beslenme gereksinimlerine göre ayarlandı. Kontrol diyetindeki aflatoksin seviyesi tespit edilebilir sınırın altındaydı (kilogram diyet başına bir mikrogramdan az). Küflü mısır taneleri yerel yem fabrikalarından temin edildi ve küf oluşumunu artırmak için iki ay boyunca %20 bağıl nemde saklandı ve ardından küf oluşumunu engellemek için tamamen kurutuldu. Küflü veya aflatoksin içeren diyetler, küf bulaşmış mısırın sağlıklı mısırla değiştirilmesiyle hazırlandı. Aflatoksin konsantrasyonlarını ölçmek için AOAC (2000) yönergelerine göre yüksek performanslı sıvı kromatografisi kullanıldı.
Küf bulaşmış diyetlerin son analizi, %78,6’sı aflatoksin B1, %8’i aflatoksin B2, %11’i aflatoksin G1 ve %2,4’ü aflatoksin G2 olmak üzere 254 ppb aflatoksin varlığını gösterdi. Deneysel süre boyunca, kontrol ve kontamine diyetler aflatoksin seviyeleri açısından analiz edildi ve kontrol diyetindeki aflatoksin seviyeleri tespit edilebilir sınırın altındaydı (kilogram başına 10 mikrogramdan az) ve kontamine diyetlerdeki aflatoksin seviyeleri yaklaşık 285-278 ppb idi.
Deneysel tasarım, civcivler ve veri toplama
Toplam 320 Ross 308 piliç, 42 gün boyunca 5 tedavi, 4 tekrar ve deney birimi başına 16 civciv ile tamamen rastgele bir tasarımda altlıkta yetiştirildi. Deneysel uygulamalar şunlardır: 1) Negatif kontrol (aflatoksin içermeyen diyet ve Bentomax Plus) 2) Pozitif kontrol (aflatoksin içeren) 3) Pozitif kontrol + 0,5 kg/ton Bentomax Plus 4) Pozitif kontrol + 1 kg/ton Bentomax Plus 5) Pozitif kontrol + 2 kg/ton Bentomax Plus.
Deneysel periyodun 42. gününde, her tekrarlamadan ortalamaya yakın ağırlığa sahip iki tavuk seçildi ve juguler ven kesilerek kesildi. Karkas ağırlığı, karın yağı, karaciğer ve taşlık, kalp, dalak ve Fabricius bursası gibi karkas özelliklerine ilişkin özellikleri belirlemek için karkaslar standart bir yöntem kullanılarak ayrıldı ve ± 0,01 g hassasiyete sahip dijital bir terazi kullanılarak tartıldı ve kuşun canlı ağırlığının yüzdesi olarak ifade edildi. Elde edilen veriler tamamen rastgele bir tasarımda analiz edildi. Verileri analiz etmek için SAS istatistik yazılımı sürüm 9.1’in (2001) GLM prosedürü kullanıldı. Ortalamaları 0,5 anlamlılık düzeyinde karşılaştırmak için Duncan’ın çoklu aralık testi kullanıldı.
Bu tasarımın istatistiksel modeli şu şekildedir:
Yij = µ + Ti + eij
Yij = j tekrarındaki i. tedavideki her gözlemin değeri, µ = ilgi duyulan özellik için popülasyon ortalaması, Ti = i. tedavinin etkisi, eij = kalıntı etkiler (deneysel hata).
Sonuçlar ve Tartışma
Aflatoksinle kirlenmiş diyetle ve farklı seviyelerde Bentomax Plus ilavesiyle beslenen piliçlerde yem alımı, vücut ağırlığı artışı ve dönüşüm oranı sonuçları Tablo 1’de verilmiştir. Vücut ağırlığı artışı ve yem tüketimi yetiştirme döneminde aflatoksinden etkilenmiş, pozitif kontrol grubu negatif kontrol grubuna kıyasla en düşük kilo artışına ve yem tüketimine sahip olmuştur (p<0,05), ancak alan gruplar pozitif kontrol grubuna kıyasla daha iyi kilo artışına ve yem tüketimine sahip olmuştur ve 2 kg/ton Bentomax Plus alan tedavi negatif kontrol grubundan önemli ölçüde farklı olmamıştır. Yetiştirme dönemi boyunca dönüşüm oranı açısından, negatif kontrol grubu diğer gruplardan önemli ölçüde düşük olmuştur (p<0,05). Bentomax Plus ile birlikte aflatoksin alan gruplardaki dönüşüm oranı pozitif kontrol grubundan önemli ölçüde yüksek olmuştur (p<0,05). Kümes hayvanlarında ve evcil hayvanlarda aflatoksinozun yaygın belirtileri düşük büyüme hızı ve zayıf performanstır. Kanatlı sürülerinde vücut ağırlığı kazanımındaki başarısızlık ekonomik kayıplara ve ciddi aflatoksin kaynaklı hastalıklara yol açar (Basmakioglu vd., 2005). Aflatoksinlerin yem alımı, vücut ağırlığı kazanımı ve yem dönüşüm oranı üzerindeki olumsuz etkilerinin iştahsızlık, ilgisizlik ve protein sentezi ve lipogenezin inhibisyonu sonucu olması muhtemeldir (Oguz vd., 2000). Hepatik reaksiyonlarda ve protein ve yağ kullanım mekanizmalarında oluşan hasar performansı, büyümeyi ve genel sağlığı etkileyebilir (Otatatli vd., 2005). Bu deneyde aflatoksin ve adsorbanların performans ve büyüme üzerindeki etkilerine ilişkin sonuçlar önceki raporlarla tutarlıdır (Raju vd., 2000). Adsorbanların etkili faktörü kısa sürede mikotoksinlere hızla dahil olmalarıdır. Aflatoksinle kirlenmiş diyetlere eklenen emiciler bu toksini emer, hayvanın sindirim sisteminde emilimini engeller ve toksini kendileriyle birlikte atar (Lee ve ark., 2010). Mevcut deneyde, toksin bağlayıcı Bentomax Plus’ın üç seviyesinin de eklenmesi büyüme ve performans göstergelerini iyileştirdi, ancak istatistiksel olarak, 2 kg/ton Bentomax Plus ile birlikte aflatoksin B1 ile kirlenmiş yem alan grup negatif kontrol grubuna daha yakındı.
Farklı uygulamaların iç organların relatif ağırlıkları üzerindeki etkilerinin sonuçları Tablo 2’de gösterilmiştir. Pozitif kontrol grubunda karkas verimi negatif kontrole kıyasla en düşüktü (p<0,05) ve negatif kontrol grubuyla 1 ve 2 kg Bentomax Plus’ın iki seviyesi arasında anlamlı bir fark yoktu. Gruplar arasında kalp, taşlık, ön mide ve dalağın relatif ağırlıklarında anlamlı bir fark yoktu. Karın yağının relatif ağırlığında uygulamalar arasında anlamlı bir fark yoktu, ancak pozitif kontrol grubunda diğer gruba kıyasla daha yüksekti. Karaciğerin aflatoksin zehirlenmesinden etkilenen ilk organ olduğu görülmektedir (Miyazu vd., 2005). Aflatoksin tüketiminin bir sonucu olarak karaciğerin relatif ağırlığında bir artış Kubena vd. (1998) ve Hoff vd. (1986) tarafından da bildirilmiştir. Aflatoksin içeren bir diyetle beslenen tavukların karaciğeri, sağlıklı bir diyetle beslenen tavukların karaciğerine kıyasla; Daha büyük, daha sarı, daha şişman ve daha kırılgandı. Aflatoksin içeren diyetlerle beslenen tavuklarda relatif karaciğer ağırlığındaki artışın nedenlerinden biri, yağ metabolizmasındaki bir bozukluktan kaynaklanan yağ birikimindeki artıştır (Daghir ve ark., 1995). Pozitif kontrol grubunda Fabricius bursasının relatif ağırlığı, diğer gruplara kıyasla önemli ölçüde azaldı (p<0,05). Hoff ve ark. (1986), farklı aflatoksin düzeylerinin karaciğer, ön mide, taşlık, dalak ve böbrek organları üzerindeki etkisini inceledi. Bu organlar arasında karaciğer, diğer organlardan tüm aflatoksin düzeylerine karşı daha hassastı ve diyetteki aflatoksin arttıkça karaciğerin relatif ağırlığı da arttı (Hoff ve ark., 1984). Etlik piliçlerin diyetinde 0,5-0,25 ppm aflatoksin ile beslenmenin karaciğer ve bursa Fabricius’un göreceli ağırlığı üzerinde önemli bir etkiye sahip olduğu, ancak dalak ve timüs’ün göreceli ağırlığı üzerinde bir etkisi olmadığı bildirilmiştir (Bartoff ve ark., 1985). Bu çalışmada mikotoksin adsorbanların kullanımı, aflatoksinin karaciğer ve bursa Fabricius’un göreceli ağırlığı üzerindeki etkisini azaltmıştır, böylece mikotoksin adsorban içeren uygulamalarla sağlıklı kontrol uygulaması arasında önemli bir fark gözlenmemiştir. Ancak mikotoksin adsorbanların kullanımıyla aflatoksinin organlar üzerindeki etkisi tamamen ortadan kaldırılmamıştır, bu da bu iki organın aflatoksine karşı duyarlılığını tekrar göstermektedir. 0,2 ppm aflatoksin B1 içeren bir diyete %0,3 sodyum bentonit eklenmesinin Ross suşu piliçlerde karaciğer, böbrek ve dalağın göreceli ağırlığını azalttığı bildirilmiştir (Miyazo vd., 2005). Mevcut çalışmada olduğu gibi, doğal olarak kirlenmiş ve 168 ppb aflatoksin içeren aflatoksin içeren diyetlerle beslenen tavuklarda karaciğer ve taşlık göreceli ağırlığında artış bildirilmiştir ve söz konusu çalışmada aflatoksinin karaciğer ve taşlık göreceli ağırlığındaki artışa olan etkisi maya hücre duvarları kullanılarak ortadan kaldırılmıştır (Aravind vd., 2003). Etlik piliçlerin diyetinde bulunan aflatoksinin, aflatoksinsiz diyete kıyasla iç organlarının performansı ve ağırlığı üzerinde olumsuz etkilere sahip olduğu sonucuna varılmıştır. Yemde mineral ve organik toksin adsorbanları ile maya hücre duvarlarının kullanılması, tavukların iç organları ve fonksiyonları üzerinde aflatoksinin olumsuz etkilerini azaltarak performanslarını artırmaktadır.
