Özet
Bu çalışmada, PowerPro Chitica probiyotiği, ChitaCel Chitica prebiyotiği ve bunların kombinasyonunun alabalıklarda fonksiyonel özellikler, kan parametreleri ve bazı karaciğer enzimleri üzerindeki etkilerini araştırmak amacıyla, ortalama ağırlığı 6 gram olan 1500 adet alabalık yavrusu 4 işleme ve 5 tekrarlamaya bölündü ve her tekrarda 75 adet olacak şekilde uygulandı. Deneysel işlemler şunları içeriyordu: 1- Kontrol işlemi (katkısız) 2- Ton başına 150 gram PowerPro Chitica probiyotiği ekleme 3- Ton başına bir kilogram ChitaCel Chitica maya duvarı ekleme 4- Ton başına 150 gram PowerPro Chitica probiyotiği ekleme + ton başına bir kilogram ChitaCel maya duvarı ekleme. Sonuçlar, probiyotik, prebiyotik ve sinbiyotik kullanımının, kontrol grubuna kıyasla dönem sonunda son ağırlığı, balık uzunluğunu önemli ölçüde artırdığını, hayatta kalma oranını ve özgül büyüme oranını artırdığını ve ayrıca kontrol grubuna kıyasla yem dönüşüm oranını önemli ölçüde azalttığını gösterdi. Probiyotik, prebiyotik ve sinbiyotik alan gruplarda beyaz kan hücrelerinin sayısı önemli ölçüde azaldı. Probiyotik, prebiyotik ve sinbiyotik alan grupta kandaki katalaz enzimi miktarı önemli ölçüde arttı. Elde edilen verilere göre, probiyotik ve prebiyotiklerin ve bunların kombinasyonunun 150 g/ton probiyotik ve 1 kg/ton sinbiyotik ve bunların kombinasyonunun diyette kullanılmasının soğuk su alabalığı balıklarının performansı üzerinde olumlu etkileri olduğu bildirilebilir.
Giriş
Son zamanlarda, su ürünleri yetiştiriciliğindeki temel endişe, yem ve çevre koşullarından etkilenebilen balıkların sağlığını ve refahını korumaktır. Son yıllarda, hastalık önleme önemli ölçüde artmış ve kimyasal katkı maddelerine alternatif olarak yem katkı maddelerinin kullanımına özel dikkat gösterilmiştir. Probiyotikler, prebiyotikler ve sinbiyotikler yem katkı maddeleridir [1-5]. Probiyotikler, yeterli miktarda uygulandığında konakçıya sağlık yararı sağlayan canlı mikroorganizmalar olarak tanımlanır. [6,7]. Probiyotiklerin, büyümeyi teşvik ederek, patojenik bakterileri azaltarak hayatta kalmayı iyileştirerek ve bağırsak mikroflorasını değiştirerek konakçıyı etkilediği gösterilmiştir [5,9,8]. Probiyotiklerin bazı olumlu etkileri arasında gelişmiş bağışıklık tepkileri, besin duvarına rekabetçi yapışma ve birlikte konakçıyı hastalıktan koruyan antibakteriyel maddelerin üretimi yer alır. Prebiyotikler genellikle bağırsakta sindirilmeyen veya emilmeyen, ancak sağlıklı bir bağırsak mikrobiyotasının büyümesi ve gelişimi için uygun koşullar sağlayan mikrobiyal olmayan kökenli maddelerdir [10]. Mannan oligosakkaritler (MOS’lar), memeli ve balık enzimleri tarafından sindirilmeyen ancak mikrobiyal enzimler tarafından sindirilen prebiyotiklerdir [11]. Probiyotikler, hem yem kullanım verimliliğini en üst düzeye çıkararak (yani FCR’yi azaltarak) hem de bağışıklık hücrelerini aktive ederek çeşitli patojenlerin görülme sıklığını azaltarak konakçı hayvana fayda sağlar. Prebiyotikler, yararlı bağırsak bakterilerinin modülasyonunu etkileyerek ve temel sindirim enzimlerinin salgılanmasını uyararak hayvana yardımcı olabilir, böylece besinleri balıklar için daha kolay ulaşılabilir hale getirebilir. Aynı zamanda, sinbiyotikler hayatta kalma oranlarını iyileştirir ve sindirim sistemindeki mikrobiyal bileşimi değiştirir, böylece su ürünleri yetiştiriciliği üretimini yalnızca probiyotik veya prebiyotik kullanımından daha etkili bir şekilde iyileştirmeye yardımcı olur [12]. Sinbiyotikler, bağırsaktaki yararlı mikroorganizmaların hayatta kalmasını ve aktivitesini iyileştirerek konak üzerinde yararlı bir etkiye sahip olan prebiyotiklerin ve probiyotiklerin eş zamanlı kullanımıdır. Sinbiyotiklerin uygulanması sırasında, prebiyotiklerin temel özelliği probiyotik bakterilerin büyümesinin seçici olarak uyarılmasıdır. Bu nedenle, yüksek sayıda probiyotik bakteri mukoza zarlarını kolonize eder ve substratlar ve penetrasyon bölgeleri için rekabet ederek patojenlerin yapışmasını önler [13]. Balık yetiştiriciliğinde patojen Aeromonas hydrophila’nın neden olduğu sorunlar, hareketli Aeromonas ile iki biçimde septisemi oluşmasından kaynaklanır: iç kanama ve akut genel bakteriyemi indüksiyonu ve yüksek ölüm oranı gösteren cilt ülserlerinin ortaya çıkması. [14]. Bazı yazarlar [15,16], özellikle Aeromonas hydrophila enfeksiyonundan sonra, probiyotik bakteri Lactobacillus plantarum ve prebiyotiklerle (β-glukan ve MOS) balıkların beslenmesinin daha iyi bir bağışıklık tepkisi verdiğini bildirmiştir. Birkaç çalışma, patojenik Pseudomonas türlerinin kontrolünde probiyotiklerin rolünü kanıtlamıştır. Bazı mevcut veriler, Bacillus türlerinin Pseudomonas enfeksiyonlarıyla mücadelede potansiyel probiyotikler olarak kabul edilebileceğine dair kanıtlar bildirmiştir. Örneğin, bir çalışmada, Bacillus subtilis tarafından sentezlenen bakteriyosinler, Pseudomonas fluorescens’e karşı inhibe edici aktiviteler göstermiştir [17]. Su ürünleri yetiştiriciliği diyetlerinde çeşitli probiyotik bakteri karışımları içeren çeşitli ticari ürünler kullanılmıştır. Bir çalışmada, BioPlus gökkuşağı alabalığı ve Nil tilapisi üzerinde test edilmiş ve büyüme performansı, bağışıklık tepkisi ve patojenik bakterilere karşı dirençte faydalar göstermiştir. [18] Benzer şekilde, diğer araştırmacılar BioPlus’ın gökkuşağı alabalığı yavrularının ve larvalarının büyümesine yardımcı olduğunu göstermiştir [19-23]. Bu amaçla bu çalışmada, probiyotik PowerPro Chitica, maya hücre duvarı Chitacell Chitica ve bu iki ürünün kombinasyonunun (sinbiyotik) alabalıklarda performans, kan parametreleri ve bazı karaciğer antioksidan enzimleri üzerine etkileri araştırılmıştır.
Malzemeler ve Yöntemler
Bu deney Kalat-Meşhed yolunun 50. km’sinde bulunan bir balık çiftliği kompleksinde gerçekleştirildi. Başlangıçta, üreme tankları 1 mg/litre oranında potasyum permanganat kullanılarak dezenfekte edildi. Deneysel diyetler UFFDA diyet yazma yazılımı kullanılarak ayarlandı. Bu amaçla, ortalama ağırlığı 6 gram olan 1500 adet somon yavrusu 4 işleme ve 5 tekrarlamaya ve her tekrarda 75 parçaya bölündü. Deneysel işlemler şunları içeriyordu: 1- Kontrol işlemi (katkısız) 2- Ton başına 150 gram Chitika Power Pro probiyotik ekleme 3- Ton başına bir kilogram Chitika Chitacell maya duvarı ekleme 4- Ton başına 150 gram Chitika Power Pro probiyotik ekleme + ton başına bir kilogram Chitika Chitacell maya duvarı ekleme. Bu deneyde kullanılan probiyotikler ve prebiyotikler Chitika Şirketi’nden temin edildi. Deneyde kullanılan probiyotik, Chitika Şirketi’nden PowerPro Chitika marka adı altında elde edildi ve şirketin iddiasına göre gram başına 1012 bakteri kolonisi ile 8 bakteri suşu (Lactobacillus rhamnosus, Bacillus subtilis, Bacillus lichiniformis, Enterococcus faecium, Pediococcicus acidi lacticus, Lactobacillus casei, Lactobacillus acidophilus ve Lactobacillus plantarum) içeriyordu. Kullanılan maya hücre duvarı da Saccharomyces cerevisiae mayasından izole edildi. Başlangıçta 14 günlük bir uyum süreci vardı ve ardından yetiştirme süreci 60 gün sürdü ve günde 4 kez vücut ağırlığının %3’ü oranında besleme yapıldı. Balıkların büyüme performansı ve ağırlığı ve uzunluğu (her havuzda rastgele 30 balık) her 15 günde bir gerçekleştirildi.
Deneyin sonunda balıklar karanfil tozu (300 mg/L) ile anestezi altına alındı ve balıkların bireysel biyometrisi, 0,1 cm doğrulukta uzunluk ölçümü ve 0,001 g’lık bir terazi ile ağırlık ölçümü dahil olmak üzere gerçekleştirildi. Performans parametrelerini ölçmek için aşağıdaki göstergeler kullanıldı.
Durum indeksi: Durum indeksini ölçmek için aşağıdaki formül kullanıldı.
100 * (cm cinsinden toplam uzunluk / ağırlık (g)) = durum indeksi
Tüm yetiştirme döneminde vücut ağırlığı kazanımının yüzdesi de aşağıdaki formülden elde edildi.
100 * (başlangıç ağırlığı / (başlangıç ağırlığı – son ağırlık)) = vücut ağırlığı kazanımının yüzdesi
Belirli büyüme oranı da günlük vücut ağırlığı kazanımını gösteren aşağıdaki ilişkiden elde edildi.
Gün / (başlangıç ağırlığının doğal logaritması – son ağırlığın doğal logaritması (g)) = özgül büyüme oranı
Yem dönüşüm oranı ayrıca tüketilen yem miktarının başlangıç ağırlığı ile son ağırlık arasındaki farka bölünmesiyle elde edildi.
Suyun fizikokimyasal parametreleri Tablo 1’de bildirilmiştir. Balıkları karanfil özütüyle anestezi altına aldıktan sonra kan parametrelerini incelemek için, heparin şırıngaları kullanılarak karın damarlarından kan alındı. Kan, kan parametrelerinin değerlendirilmesi için hemen Razavi Uzman Hastanesi laboratuvarına transfer edildi.
İstatistiksel analiz: Tüm veriler Excel yazılımına girildi ve sıralandı. Daha sonra, JAMP yazılımı kullanılarak normallik test edildi ve daha sonra, tamamen rastgele bir tasarımda GLM prosedürü kullanılarak SAS-9.3 yazılımı kullanılarak istatistiksel analiz yapıldı. Ortalamaları 0,05 anlamlılık düzeyinde karşılaştırmak için Duncan’ın çoklu aralık testi kullanıldı.
Sonuçlar ve Tartışma
Tablo 3, deneysel işlemlerin (PowerPro Chitica probiyotiği, Chitacell Chitica ve probiyotik-prebiyotik karışımı) soğuk su alabalığındaki performans özellikleri üzerindeki etkilerini bildirmektedir. Sonuçlar, deneysel işlemlerin son ağırlık, dönem sonunda balık uzunluğu, özgül büyüme oranı, yem dönüşüm oranı ve hayatta kalma oranı üzerinde önemli bir etkiye sahip olduğunu göstermiştir. Probiyotik, prebiyotik ve sinbiyotikle beslenen gruplarda son ağırlık, kontrol grubundan önemli ölçüde daha yüksekti. Prebiyotik ve sinbiyotik alan gruplarda yetiştirme döneminin sonunda balık uzunluğu, kontrol grubundan önemli ölçüde daha yüksekti. Probiyotik, prebiyotik ve sinbiyotik alan gruplarda özgül büyüme oranı, kontrol grubundan önemli ölçüde daha yüksekti. Kontrol grubundaki yem dönüşüm oranı, diğer gruplardan önemli ölçüde daha yüksekti. Sinbiyotikle beslenen gruptaki hayatta kalma oranı, kontrol grubundan önemli ölçüde daha yüksekti. Birçok çalışma, probiyotiklerin suda yaşayan hayvanlarda büyümeyi, yem dönüşüm oranını ve hayatta kalma oranını artırmada olumlu etkisi olduğunu göstermektedir. [24,25]. Birçok çalışmada probiyotiklerin bakteriyosin ve enzimler üreterek bağırsaktaki besinlerin sindirilebilirliğini artırdığı ve ayrıca bağırsak asitliğini azaltarak minerallerin daha fazla emilmesine yol açtığı bildirilmiştir. [26,27]. Öte yandan probiyotikler bağırsağı etkileyerek ve bağırsakta baskınlık oluşturarak içindeki patojen sayısını azaltır ve besinlerin sindirilebilirliğini artırır[28]. Ayrıca probiyotikler selülaz, fitaz, lipaz, proteaz ve amilaz gibi enzimler üreterek besinlerin sindirilebilirliğini ve dolayısıyla yem dönüşüm oranını doğrudan etkiler[29].
Soğuk su alabalığının bazı kan özellikleri üzerine deneysel uygulamaların etkileri Tablo 4’te bildirilmiştir. Beyaz kan hücresi, hemoglobin ve kan albümini sayısı deneysel uygulamalardan etkilenmiştir. Prebiyotik ve sinbiyotikle beslenen grupta beyaz kan hücresi sayısı kontrol grubuna göre anlamlı derecede düşük bulunmuştur. PowerPro Chitica probiyotiği, Chitacell Chitica prebiyotiği ve sinbiyotik alan balıkların kanındaki hemoglobin miktarı kontrol grubuna göre anlamlı derecede yüksek bulunmuştur. Sinbiyotik alan grupta kan albümini miktarı kontrol grubuna göre anlamlı derecede yüksek bulunmuştur. Deneysel uygulamaların kırmızı kan hücresi sayısı, hematokrit, protein ve kan globulini üzerinde anlamlı bir etkisi olmamıştır. Probiyotik ve sinbiyotiklerin vitamin ve minerallerin sindirilebilirliği ve farklı döngülerde koenzim olarak bulunmaları üzerindeki olumlu etkileri göz önüne alındığında, mevcut etkiler haklı çıkarılabilir. Bir çalışmada, iki probiyotik suşunun karışımının kullanılmasının kandaki hemoglobini artırdığı bildirilmiştir. [6,7]. Başka bir çalışmada, levrek balığının diyetinde probiyotik kullanımının kan hemoglobin düzeylerini önemli ölçüde artırdığı tespit edilmiştir [30].
Tablo 5’te soğuk su gökkuşağı alabalığında probiyotik PowerPro Chitica, prebiyotik Chitica ve bunların kombinasyonunun karaciğer antioksidan enzim seviyeleri üzerindeki etkisi bildirilmektedir. Probiyotik, prebiyotik ve sinbiyotik alan gruplarda kan serumundaki katalaz enzim seviyeleri kontrol grubuna göre anlamlı derecede yüksekti. Süperoksit dismutaz ve glutatyon peroksidaz seviyeleri deneysel uygulamalardan etkilenmedi. Vücudun antioksidan savunma kapasitesi doğrudan vücut sağlığı ile ilgilidir. Probiyotik kullanımı balık vücudundaki antioksidan aktiviteyi artırır. Son yapılan bir çalışmada, Nil tilapia balığının diyetinde probiyotik Lactobacillus plantarum’un kullanılması katalaz, süperoksit dismutaz ve glutatyon peroksidaz gibi antioksidan enzim aktivitesi seviyesini artırdı [28]. Mozanzadeh ve arkadaşları tarafından yürütülen bir çalışmada 2023 yılında, Güney Asya levreğinin antioksidan kapasitesi üzerinde probiyotik karışımlarının etkisini araştırdılar ve diyete probiyotik eklemenin kan serumunda katalaz ve süperoksit dismutazın enzimatik aktivitesini artırdığını bildirdiler [30].
Sonuç
Probiyotiklerin su beslenmesinde kullanımı, patojenlerle rekabetçi bir eliminasyon mekanizmasının varlığı nedeniyle su performansı üzerinde olumlu etkilere sahiptir. Bu çalışmada, probiyotik PowerPro Chitica, prebiyotik Chitacell Chitica ve sinbiyotik kullanımı, kontrol grubuna kıyasla dönem sonunda son ağırlığı, balık uzunluğunu önemli ölçüde artırdı, hayatta kalma oranını artırdı ve özgül büyüme oranını artırdı ve ayrıca yem dönüşüm oranını kontrol grubuna kıyasla önemli ölçüde azalttı. Probiyotik, prebiyotik ve sinbiyotik alan gruplarda beyaz kan hücrelerinin sayısı önemli ölçüde azaldı. Probiyotik, prebiyotik ve sinbiyotik alan grupta kandaki katalaz enzimi miktarı önemli ölçüde arttı. Elde edilen verilere göre, probiyotik ve prebiyotiklerin ve bunların kombinasyonlarının, ton başına 150 gram probiyotik ve ton başına bir kilogram sinbiyotik konsantrasyonlarında diyette kullanılmasının ve bunların kombinasyonunun soğuk su alabalığı balıklarının performansı üzerinde olumlu etkilere sahip olduğu bildirilebilir.
