چکیده
این پژوهش به منظور ارزیابی تاثیر پروبیوتیک پاورپرو شرکت چیتیکا که حاوی هشت سویه باکتری پروبیوتیک (لاکتوباسیلوس رامنوسوس، باسیلوس سوبتیلیس، باسیلوس لیچینیفورمیس، انتروکوکوس فاسیوم، پدیوکوکوس اسیدی لاکتیسی، لاکتوباسیلوس کازئی، لاکتوباسیلوس اسیدیفیلوس و لاکتوباسیلوس پلانتاروم) است بر عملکرد، جوجه درآوری و کیفیت پوسته تخم مرغ مادر تخمگذار در سن 52 تا 60 هفتگی انجام شد. این آزمایش در قالب طرح کاملا تصادفی با 110 قطعه مرغ و خروس مادر گوشتی (100 قطعه مرغ و 10 عدد خروس) با دو تیمار و 5 تکرار و 11 قطعه در هر تکرار (10 قطعه خروس و یک قطعه خروس) اجرا شد. تیمارهای آزمایشی شامل 1)کنترل (جیره پایه) 2) جیره پایه + 100 گرم در تن پروبیوتیک پاور پرو
( cfu/gr1012) بود. مصرف پروبیوتیک تاثیر معنی داری بر مقدارخوراک مصرفی، درصد تولید، وزن تخم مرغ، تولید تخم مرغ و ضریب تبدیل غذایی نداشت اما در دوره دوم آزمایش (ماه دوم) درصد تولید تخم مرغ، ضریب تبدیل غذایی و وزن توده تخم مرغ در گروه تغذیه شده با پروبیوتیک بهبود یافت و نزدیک به معنی داری بود. درصد تخم مرغ با قابلیت جوجه کشی و درصد تخم مرغ هچ شده در طی هفته های 56 تا 60، بطور معنی داری در گروه تغذیه شده با پروبیوتیک در مقایسه با گروه کنترل افزایش یافت (P≤0.05). تخم مرغ با قابلیت جوجه کشی در دوره دوم آزمایش، در گروه تغذیه شده با پروبیوتیک 4.44 درصد نسبت به گروه کنترل افزایش یافت. تیمارهای آزمایشی اثر معنی داری بر درصد زرده و شاخص شکل نداشتند اما واحد هاو ، درصد پوسته و ضخامت پوسته تغییرات معنی داری داشتند. واحد هاو در دور دوم آزمایش 2.64 واحد در گروه پروبیوتیک افزایش یافت (P≤0.05). درصد پوسته و ضخامت آن در گروه تغذیه شده با پروبیوتیک بطور معنی داری بیشتر از گروه کنترل بود. بهبود کیفیت تخم مرغ و جوجه درآوری در طی هشت هفته آزمایش نشان داد که استفاده از پروبیوتیک میتواند کمک بسیار خوبی به سلامتی و تولید حیوان و در انتها به صنعت مرغ مادر داشته باشد.
مقدمه
برای بهبود سلامت و عملکرد تولیدی دام از آنتی بیوتیک ها استفاده می شود. آنتی بیوتیک ها باعث ظهور میکروارگانیسم هایی با مقاومت بالا به دارو می شوند. به همین دلیل اتحادیه اروپا استفاده از آنتی بیوتیک ها را بعنوان محرک رشد در صنعت طیور ممنوع کرده است و بسیاری از کشورها بصورت فزاینده ای استفاده پیشگیرانه از آنتی بیوتیک ها را در حیوانات بعنوان محرک رشد محدود کرده اند. از این رو فعالان این صنعت بدنبال جایگزینی مناسب برای آن هستند که بسیاری از ترکیبات از جمله مخمر، گیاهان دارویی، اسانس ها، پروبیوتیک، پری بیوتیک، سین بیوتیک، اسیدهای آلی و … را مورد بررسی قرار داده اند. پروبیوتیک ها میکروارگانیسم های زنده ای هستند که زمانی که در جیره غذایی قرار میگیرند باعث بهبود تعادل میکروبی روده میزبان می شوند. اولین توجه به اهمیت پروبیوتیک ها توسط پودلسکی در سال 1988(Podolsky,1988) بود او بر این باور بود که زندگی سالم دهقانان بلغاری ناشی از مصرف محصولات شیر تخمیر شده است. پروبیوتیک ها با استفاده از مکانیسم حذف رقابتی از رشد میکروارگانیسم های بیماری زا و ماندگاری آنها در روده جلوگیری میکند (Nurmi and Ratala, 1973) با انسداد سایت های گیرنده در پرزهای روده و همچنین تحریک سیستم ایمنی(Sultan and Abdul-Rahman, 2011) باعث بهبود عملکرد و قابلیت هضم جیره در مرغ های گوشتی (Santos and Ferket, 2006) می شود. اخیرا از پروبیوتیک ها برای بهبود عملکرد تولیدی جوجه های گوشتی (Younis,2008; Beski,2010)، بهبود پارامترهای فیزیولوژیکی و بیوشیمیایی می شود (Abdulmajeed,2010; Sallah and Al Hussary,2009 ). میکروارگانیسم های مختلفی بعنوان پروبیوتیک در تغذیه طیور مورد استفاده قرار می گیرند. از سویه های استفاده شده می توان به باسیلوس، لاکتوباسیلوس، بیفیدوباکتریوم، انتروکوکوس، لاکتوکوکوس، استرپتوکوکوس و سویه های مختلف مخمر اشاره کرد (Awad et al,2009; nahashon et al,1997 Panda et al, 2003;). بیشتر مطالعات موجود اثر پروبیوتیک بر مرغ های گوشتی و تخمگذار را مورد بررسی قرار داده است و در ارتباط با مرغ های مادر گوشتی اطلاعات بسیار محدودی وجود دارد (jin et al, 1997; Koenen et al 2004). پرورش مرغ های مادر از جهات مختلف بسیار حائز اهمیت است. بروز مشکل در مرغ های مادر بسیار زیان بار است زیرا باعث ایجاد اختلال در تولید و عرضه تخم مرغ بارور و جوجه یک روزه می شود. اکثر باکتری های موجود در روده مرغ های مادر سالم همچون لاکتوباسیلوس و استرپتوکوکوس، اسید لاکتیک تولید می کنند (Yu et al, 2008; anwar et al, 2012). اگر این جمعیت باکتریایی به دلایل مختلف از جمله ورود باکتری های مضر، عفونت مایکوپلاسمایی، استرس رمایی، استرس حمل و نقل، انجام امور مدیریتی، مایه کوبی و غیره دچار تغییرات اساسی شود توازن میان میکروب های روده تغییر کرده و به دنبال آن باکتری های فرصت طلب به سرعت تکثیر می شوند. در این مطالعه اثرات استفاده از پروبیوتیک پاور پرو از شرکت چیتیکا که دارای هشت سویه باکتری می باشد بر عملکرد و جوجه درآوری و کیفیت تخم مرغ های مادر گوشتی نژاد راس 308 مورد بررسی قرار داد.
روش تحقيق
این آزمایش در قالب طرح کاملا تصادفی با 100 قطعه مرغ مادر گوشتی و 10 فطعه خروس مادر گوشتی با دو تیمار و 5 تکرار (10 قطعه مرغ و یک قطعه خروس در هر تکرار) انجام شد. جایگاه های درنظر گرفته شده برای هرکدام از تکرار ها 1.5*1.5 متر مربع بود که در داخل هر کدام از آشیانه ها یک لانه تخم گذاری، آبخوری نیپل و دانخوری آویز وجود داشت. تهویه آشیانه ها بصورت عرضی بود که هواکش ها در ضلع شرقی و پنجره های هواده در ضلع غربی آشیانه ها قرار گرفته بود. سن مرغ های مادر 50 هفته بود و و آزمایش به مدت 10 هفته صورت گرفت (دو هفته عادت پذیری و 8 هفته طول دوره نمونه برداری). برنامه نوری دارای 16 ساعت روشنایی و 8 ساعت تاریکی بود. دمای داخل سالن در طول دوره آزمایش 22-20 درجه سانتی گراد بود. برای بستر از پوشال چوب به ضخامت 5 سانتی متر استفاده شد. جیره های آزمایشی بر پایه ذرت و کنجاله سویا و بر اساس وزن بدن توصیه راهنمای پرورش گله مرغ های مادر گوشتی راس 308 به وسیله نرم افزار UFFDA تنظیم شد که حاوی 2700 کیلوکالری انرژی قابل متابولیسم و 14.1 درصد پروتئین بود. ترکیب جیره و آنالیز تقریبی مواد مغذی در جدول یک نشان داده شده استمیزان خوراک مصرفی در سن 50 هفتگی 155 گرم به ازای هر پرنده بود و برای هفته های بعد بر طبق مدل ارائه شده توسط رییز و همکاران در سال 2012 (Reyes et al,2012) تعیین گردید که براساس میزان تولید، دما و وزن بدن انرژی مورد نیاز روزانه محاسبه گردید.
ME=BW0.75[111.9-0.45T]1.2+5.8G+2.3EM
ME: انرژی قابل متابولیسم
BW: وزن بدن
T: دما
G: انرژی
EM: توده تخم مرغ
توزیع دان 30 دقیقه بعد از روشنایی انجام گرفت اما در خصوص مصرف آب، از ابتدای روشنایی دسترسی کامل به آب داشتند. تیمارهای آزمایشی شامل 1- جیره پایه 2- جیره پایه + 150 گرم در تن پروبیوتیک تجاری پاورپرو چیتیکا بود. پروبیوتیک تولید داخل از شرکت چیتیکا با برند پاورپرو چیتیکا تهیه گردید که بنا به ادعای شرکت دارای 8 سویه باکتری (لاکتوباسیلوس رامنوسوس، باسیلوس سوبتیلیس، باسیلوس لیچینیفورمیس، انتروکوکوس فاسیوم، پدیوکوکوس اسیدی لاکتیسی، لاکتوباسیلوس کازئی، لاکتوباسیلوس اسیدیفیلوس و لاکتوباسیلوس پلانتاروم) با 1012 عدد باکتری در هرگرم بود.
صفات تولیدی: در طول دوره آزمایش، تخم مرغ های تولید شده هر واحد آزمایشی سه مرتبه در ساعت های معینی از روز جمع آوری شده و روزانه تعداد آنها ثبت گردید تعداد تخم مرغ های قابل جوجه کشی به ازای مرغ در روز هر هفته و پایان آزمایش محاسبه گردید. برای ثبت میانگین وزن بصورت هفتگی وزن کشی شدند.
میزان خوراک مصرفی (گرم/پرنده/روز) براساس دان اضافه شده به دانخوری در ابتدای هفته و وزن کشی باقی مانده آن در انتهای هفته و تقسیم عدد بدست آمده بر روز مرغ (تعداد مرغ های موجود * روزهای محاسبه شده) بدست آمد. درصد تولید تخم مرغ نیز باتوجه به تعداد تخم مرغ های جمع آوری شده در طول ماه و تعداد روز مرغ بدست آمد. ضریب تبدیل غذایی از گرم خوراک مصرفی در طول چهار هفته و گرم تخم مرغ تولیدی محاسبه شد.
به منظور اندازه گیری درصد تخم مرغ های قابل جوجه کشی، بعد از جمع آوری تخم مرغ ها به اتاق گرید انتقال داده شد. در بدو ورود به اتاق گرید، ابتدا تخم مرغ ها توسط بخار فرمالین 3X در دمای 25 درجه و رطوبت حداقل 60 درصد ضدعفونی شد و بعد از اتمام گاز دهی، تخم مرغ ها وارد اتاق گرید شدند و در اتاق گرید درجه بندی تخم مرغ ها بدین صورت انجام شد که تخم مرغ های غیر قابل جوجه کشی (تخم مرغ های شکسته، کثیف، نا فرم، پوسته نازک و دو زرده) از تخم مرغ های قابل جوجه کشی جدا شد.
به منظور بررسی کیفی و کمی تخم مرغ، در انتهای هر ماه 4 عدد تخم مرغ بصورت تصادفی انتخاب و شماره گذاری شد و فاکتورهای وزن تخم مرغ، طول و عرض تخم مرغ (اندازه گیری شاخص شکل)، وزن زرده (برای محاسبه درصد زرده)، ارتفاع سفیده غلیظ (به منظور بررسی واحد هاو)، وزن پوسته، ضخامت پوسته و درصد پوسته اندازه گیری شد. به منظور بررسی ویژگی های مربوط به پوسته تخم مرغ، پوسته ها بعد از شکستن شدن در آون با دمای 105 درجه سانتی گراد به مدت 24 ساعت خشک گردید و پس از توزین با ترازوی با دقت 0.001 با استفاده از میکرومتر دیجیتال (مدل Isize، ساخت کشور تایوان) با دقت 0.001 از سه ناحیه پوسته هر تخم مرغ داده برداری شد.
آنالیز آماری: کلیه داده ها وارد نرم افزار ایکسل و مرتب شد. سپس با استفاده از نرم افزار JAMP مورد تست نرمالیته قرار گرفت و سپس با استفاده از نرم افزار SAS-9.3 [SAS, 2004] رویه ی GLM در قالب طرح کاملا تصادفی مورد تجزیه و تحلیل آماری قرار گرفت و جهت مقایسه میانگین ها نیز از آزمون چند دامنه ای دانکن در سطح معنی داری 0/05 استفاده شد.

نتایج
در جدول دو اثر پروبیوتیک تجاری پاورپرو چیتیکا بر صفات عملکردی مرغ های مادر گوشتی سویه راس 308 در سن 52 تا 60 هفتگی گزارش شده است. مصرف پروبیوتیک اثر معنی داری بر مقدارخوراک مصرفی، درصد تولید، وزن تخم مرغ، تولید تخم مرغ و ضریب تبدیل غذایی نداشت. در دوره 56 تا 60 هفتگی درصد تولید تخم مرغ در گروه تغذیه شده با پروبیوتیک بصورت عددی بیشتر از گروه کنترل بود و نزدیک به معنی داری بود (0.0610(P≥. توده تخم مرغ تولیدی (گرم/مرغ/روز) تحت تاثیر پروبیوتیک از لحاظ معنی داری، معنی دار نبود اما نزدیک به معنی داری بود (0.0780(P≥. ضریب تبدیل غذایی باتوجه به اینکه از لحاظ آماری معنی دار نبود اما در گروه تغذیه شده با پروبیوتیک در ماه دوم آزمایش 0.23 کاهش نشان داد.

اثر استفاده از پروبیوتیک بر صفات مربوط به جوجه درآوری مرغ های مادر گوشتی در سن 52 تا 60 هفتگی در جدول دو گزارش شده است. نتایج نشان داد که در دوره دوم آزمایش (56 تا 60 هفتگی) پروبیوتیک توانست بطور معنی داری باعث افزایش درصد تخم مرغ ها با قابلیت جوجه کشی و درصد تخم مرغ های هچ شده شود(P≤0.05). درصد تخم مرغ های با قابلیت جوجه کش در گروه تغذیه شده با پروبیوتیک پاور پرو در دوره دوم آزمایش نسبت به گروه کنترل 4.44 درصد افزایش یافت و همچنین درصد هچ شدن تخم مرغ را نیز 2.64 درصد افزایش داد.

جدول چهار نشان دهنده اثر پروبیوتیک پاور پرو چیتیکا بر صفات کیفی تخم مرغ های مادر گوشتی سویه راس 308 در سن 52 تا 60 هفتگی است. واحد هاو در ماه دوم آزمایش بطور معنی داری در گروه دریافت کننده پروبیوتیک نسبت به گروه کنترل افزایش یافت(P≤0.05). درصد پوسته تخم مرغ در کل دوره آزمایشی در تحت تاثیر تیمارهای آزمایشی قرار گرفت و گروه تغذیه شده با پروبیوتیک بطور معنی داری درصد پوسته بیشتری نسبت به گروه کنترل داشتند(P≤0.05). تیمارهای آزمایشی اثر معنی داری بر درصد زرده تخم مرغ و شاخص شکل آن نداشتند. ضخامت پوسته در دوره اول آزمایش تحت تاثیر تیمار پروبیوتیک قرار نرفت اما در دوره دوم در گروه دریافت کننده پروبیوتیک پاورپروچیتیکا بطور معنی داری نسبت به گروه کنترل افزایش یافت.

بحث و نتیجه گیری
همانطور که در جدول 2 نشان داده شده است پروبیوتیک اثر معنی داری بر صفات عملکردی مرغ های مادر گوشتی نداشت اما باتوجه به اینکه ضریب تبدیل غذایی در گروه تغذیه شده با پروبیوتیک پایینتر از گروه کنترل بود و عدد آن نزدیک به معنی داری بود میتوان گفت که اثرات مثبتی بر روی ضریب تبدیل غذایی داشته است و باتوجه به اینکه در دوره دوم آزمایش نسبت به دوره اول ضریب تبدیل در گروه تغذیه شده با پروبیوتیک تغییری نداشته اما در گروه کنترل بیشتر شده است (در گروه کنترل در دوره اول 3.93 بود که در دور دوم 4.03 شد اما در گروه تغذیه شده با پروبیوتیک 3.81 به 3.82 رسید). درصد تولید تخم مرغ نیز بهمراه توده تخم مرغ تولیدی در دوره دوم نزدیک به معنی داری بود. مشابه با نتایج این تحقیق افزودن سه سطح 250، 500 و 750 گرم در کیلوگرم پروبیوتیک تجاری چند سویه پروتکسین بر تولید تخم مرغ در مرغ های تخمگذار معنی دار نبود (Balevi et al, 2001). همچنین افزودن 100 گرم در تن لاکتوباسیلوس اسپوروجنیس بر عملکرد مرغ های تخمگذار اثری معنی دار نداشت (Khan et al, 2011). در مقابل برخی از مطالعات نشان دهنده اثرات معنی دار پروبیوتیک بر عملکرد مرغ های تخمگذار بودند (Khan et al, 2011; Tang et al, 2015; jin et al, 1998). گزارش شده است که مصرف پروبیوتیک با بهبود روند های تحریک هضمی، بهره وری مواد مغذی را بیشتر می کند (Narushin and Romanov, 2002). پروبیوتیکها از طریق تغییر در میکروفلور روده، افزایش رشد باکتریهای مفید بی هوازی و باکتریهای گرم مثبت تولید کننده اسید لاکتیک و هیدروژن پراکسید، سرکوب رشد باکتریهای بیماریزا و افزایش هضم و بهره وری از مواد مغذی سبب بهبود ضریب تبدیل خوراک میشوند (Narushin and Romanov, 2002). آنزیمهای گلیکولتیک باکتریها نقش مهمی در تخمیر کربوهیدراتهای غیر قابل هضم دارند و در نهایت سبب بهبود عملکرد و سالمت پرنده ها میشود(Tang et al, 2015). در مطالعه حاضر پروبیوتیک ها در دوره دوم (ماه دوم آزمایش) باعث بهبود جوجه درآوری و افزایش تخم مرغ با قابلیت جوجه درآوری شد. باتوجه به اینکه در دوره اول در گروه تغذیه شده با جیره کنترل اثرات معنی دار نبود اما در دوره دوم اثرات معنی دار بود میتوان گفت که در طول گذشت زمان و جایگیری باکتری ها در محیط روده باعث بهبود ایمنی و کیفیت اسپرم و تخم مرغ می شود. تحقیقات انجام شده نشان دهنده افزایش جوجه درآوری در مرغ های تغذیه شده با پروبیوتیک بود (jin et al, 1998). رحیمی و همکاران در سال 2009 (Rahimi et al, 2009) گزارش کردند که افزودن 100 گرم در تن پروبیوتیک (دوازده سویه با غلظتcfu/gr109) باعث افزایش جوجه درآوری شد این محققین دلیل افزایش جوجه درآوری را، افزایش اندازه تخم مرغ دانستند. حاجتی و همکاران (Hajati et al, 2014) گزارش کردند که افزودن پروبیوتیک جوجه درآوری را کاهش ولی باروری را کاهش داد. تاثیر پروبیوتیک ها به عواملی از جمله ترکیب و گونه میکروبی، قابلیت زیستی،cfu، ترکیب جیره، سن پرنده و عوامل تنش زای پرنده بستگی دارد. واحد هاو در گروه تغذیه شده با پروبیوتیک بطور معنی داری در گروه تغذیه شده با پروبیوتیک افزایش یافت. فورت و همکاران (Forte et al, 2016) در مطالعه ای که 0.1 گرم در کیلوگرم لاکتوباسیلوس اسیدیفیلوس و 0.05 گرم در کیلوگرم باسیلوس سوبتیلیس (محصول تجاری) را در تغذیه مرغ های تخمگذار استفاده کردند نشان دادند که پروبیوتیک بدون تاثیر بر عملکرد تولیدی، ویژگی فیزیک و شیمیایی تخم مرغ را بهبود بخشید. پروبیوتیک پاور پرو چیتیکا توانست باعث افزایش ضخامت پوسته و ماندگاری آن در طی آزمایش بشود. که این نکته بسیار مهمی است زیرا با افزایش سن مرغ مادر اندازه تخم مرغ بزرگتر شده و ضخامت پوسته کمتر میشود و از طرفی ذخایر کلسیمی بدن مرغ کمتر میشود. مصرف پروبیوتیک با افزایش قابلیت هضم مواد معدنی تاثیر مثبت بر درصد پوسته تخم مرغ و ضخامت داشت و مانع از کاهش درصد تولید و کیفیت پوسته در طول افزایش سن شد و همچنین باتوجه به بهبود صفات عملکردی در دوره دوم آزمایش میتوان گفت که مصرف پروبیوتیک می تواند در طول زمان با بهبود میکروفلور روده و سلامت حیوان اثرات مطلوبی برعملکرد بگذارد.
